1. Мэта: Гэтая працэдура накіравана на забеспячэнне стандартызаванай працэдуры для асептычных аперацый і абароны стэрыльных памяшканняў.
2. Сфера прымянення: лабараторыя біялагічных выпрабаванняў
3. Адказная асоба: кіраўнік кантролю якасці, тэсціроўшчык
4. Вызначэнне: Няма
5. Меры бяспекі
Строга выконвайце асептычныя аперацыі, каб прадухіліць мікробнае забруджванне; аператары павінны выключыць УФ-лямпу перад уваходам у стэрыльнае памяшканне.
6. Працэдуры
6.1. Стэрыльнае памяшканне павінна быць абсталявана стэрыльнай аперацыйнай і буфернай зонай. Чысціня стэрыльнай аперацыйнай павінна дасягаць класа 10000. Тэмпература ў памяшканні павінна падтрымлівацца на ўзроўні 20-24°C, а вільготнасць — на ўзроўні 45-60%. Чысціня чыстага стала павінна дасягаць класа 100.
6.2. Стэрыльнае памяшканне павінна падтрымлівацца ў чысціні, і строга забараняецца назапашваць смецце, каб прадухіліць забруджванне.
6.3. Строга прадухіляйце забруджванне ўсяго стэрылізацыйнага абсталявання і пажыўных асяроддзяў. Тыя, хто забруджаны, павінны спыніць іх выкарыстанне.
6.4. Стэрыльнае памяшканне павінна быць абсталявана дэзінфікуючымі сродкамі працоўнай канцэнтрацыі, такімі як 5% раствор крэзолу, 70% спірт, 0,1% раствор хларметыяніну і г.д.
6.5. Стэрыльнае памяшканне павінна рэгулярна стэрылізавацца і чысціцца адпаведным дэзінфікуючым сродкам, каб забяспечыць адпаведнасць чысціні стэрыльнага памяшкання патрабаванням.
6.6. Усе інструменты, прыборы, посуд і іншыя прадметы, якія неабходна ўнесці ў стэрыльнае памяшканне, павінны быць шчыльна ўпакаваныя і стэрылізаваныя адпаведнымі метадамі.
6.7. Перад уваходам у стэрыльнае памяшканне персанал павінен вымыць рукі з мылам або дэзінфікуючым сродкам, а затым пераапрануцца ў спецыяльную рабочую вопратку, абутак, шапкі, маскі і пальчаткі ў буферным памяшканні (або зноў выцерці рукі 70% этанолам) перад уваходам у стэрыльнае памяшканне. Выконваць аперацыі ў бактэрыяльнай камеры.
6.8. Перад карыстаннем стэрыльным памяшканнем неабходна ўключыць ультрафіялетавую лямпу для апраменьвання і стэрылізацыі на працягу больш чым 30 хвілін, а таксама адначасова ўключыць абдзіманне паветрам чыстага стала. Пасля завяршэння аперацыі стэрыльнае памяшканне неабходна своечасова ачысціць, а затым стэрылізаваць ультрафіялетавым святлом на працягу 20 хвілін.
6.9. Перад праверкай вонкавая ўпакоўка выпрабавальнага ўзору павінна быць непашкоджанай і не павінна адкрывацца, каб прадухіліць забруджванне. Перад праверкай прадэзінфікуйце вонкавую паверхню ватовымі дыскамі, прасякнутымі 70% спіртам.
6.10. Падчас кожнай аперацыі неабходна праводзіць адмоўны кантроль для праверкі надзейнасці асептычнай аперацыі.
6.11. Пры ўбіранні бактэрыяльнай вадкасці неабходна выкарыстоўваць прысоску. Не дакранайцеся непасрэдна да трубачкі ротам.
6.12. Іголку для прышчэпкі неабходна стэрылізаваць полымем перад і пасля кожнага выкарыстання. Пасля астывання культуру можна прышчапіць.
6.13. Трубачкі, прабіркі, чашкі Петры і іншы посуд, які змяшчае бактэрыяльную вадкасць, варта замочыць у стэрылізацыйным вядры, які змяшчае 5% раствор лізолу, для дэзінфекцыі, а праз 24 гадзіны выняць і прамыць.
6.14. Калі на стале або падлозе пралілася бактэрыяльная вадкасць, неабходна неадкладна заліць забруджаную вобласць 5% растворам карбалавай кіслаты або 3% растворам Lysol і патрымаць не менш за 30 хвілін перад апрацоўкай. Калі рабочая вопратка і галаўныя ўборы забруджаныя бактэрыяльнай вадкасцю, іх неабходна неадкладна зняць і памыць пасля стэрылізацыі парай пад высокім ціскам.
6.15. Усе прадметы, якія змяшчаюць жывыя бактэрыі, павінны быць прадэзінфікаваны перад тым, як прамыць іх пад кранам. Забруджваць каналізацыю строга забаронена.
6.16. Колькасць калоній у стэрыльным памяшканні варта правяраць штомесяц. Адкрыўшы чысты стол, вазьміце некалькі стэрыльных чашак Петры з унутраным дыяметрам 90 мм і асептычна ўвядзіце каля 15 мл пажыўнага агаравага культуральнага асяроддзя, расплаўленага і астуджанага да тэмпературы каля 45°C. Пасля зацвярдзення пастаўце яго ўверх дном пры тэмпературы 30-35°C і інкубуйце 48 гадзін у інкубатары. Пасля пацверджання стэрыльнасці вазьміце ад 3 да 5 пласцін і змесціце іх злева, пасярэдзіне і справа ад працоўнага становішча. Пасля адкрыцця вечка і экспазіцыі на 30 хвілін змесціце іх уверх дном у інкубатар пры тэмпературы 30-35°C на 48 гадзін і выміце. Сярэдняя колькасць розных бактэрый на пласціне ў чыстай зоне класа 100 не павінна перавышаць 1 калонію, а сярэдняя колькасць у чыстым памяшканні класа 10000 не павінна перавышаць 3 калоніі. Калі ліміт перавышаны, стэрыльнае памяшканне неабходна старанна дэзінфікаваць, пакуль паўторныя праверкі не будуць адпавядаць патрабаванням.
7. Глядзіце раздзел (Метад праверкі стэрыльнасці) у «Метадах гігіенічнага кантролю лекаў» і «Кітайскіх стандартных аперацыйных практыках кантролю лекаў».
8. Аддзел дыстрыбуцыі: Аддзел кіравання якасцю
Тэхнічныя рэкамендацыі па чыстых памяшканнях:
Пасля атрымання стэрыльнага асяроддзя і стэрыльных матэрыялаў мы павінны падтрымліваць стэрыльны стан, каб вывучаць пэўны вядомы мікраарганізм або выкарыстоўваць яго функцыі. У адваротным выпадку розныя мікраарганізмы звонку могуць лёгка змяшацца. З'ява змешвання неістотных мікраарганізмаў звонку называецца забруджвальнымі бактэрыямі ў мікрабіялогіі. Прадухіленне забруджвання з'яўляецца найважнейшым метадам у мікрабіялагічнай працы. Поўная стэрылізацыя, з аднаго боку, і прадухіленне забруджвання, з другога, - гэта два аспекты асептычнай тэхнікі. Акрамя таго, мы павінны прадухіліць выцяканне даследуемых мікраарганізмаў, асабліва патагенных мікраарганізмаў або генетычна мадыфікаваных мікраарганізмаў, якія не існуюць у прыродзе, з нашых эксперыментальных кантэйнераў у знешняе асяроддзе. Для гэтых мэтаў у мікрабіялогіі існуе мноства мер.
Стэрыльны пакой звычайна ўяўляе сабой невялікі пакой, спецыяльна абсталяваны ў мікрабіялагічнай лабараторыі. Ён можа быць пабудаваны з лістоў і шкла. Плошча не павінна быць занадта вялікай, каля 4-5 квадратных метраў, а вышыня павінна быць каля 2,5 метраў. Па-за стэрыльным пакоем павінна быць арганізавана буферная пакой. Дзверы буфернай пакоя і дзверы стэрыльнага пакоя не павінны быць накіраваны ў адзін бок, каб прадухіліць пранікненне розных бактэрый паветраным патокам. Як стэрыльны пакой, так і буферны пакой павінны быць герметычнымі. Вентыляцыйнае абсталяванне памяшкання павінна мець прылады для фільтрацыі паветра. Падлога і сцены стэрыльнага пакоя павінны быць гладкімі, цяжказабруджвальнымі і лёгка чысціцца. Рабочая паверхня павінна быць роўнай. Як стэрыльны пакой, так і буферны пакой абсталяваны ультрафіялетавымі лямпамі. Ультрафіялетавыя лямпы ў стэрыльным пакоі знаходзяцца на адлегласці 1 метра ад працоўнай паверхні. Персанал, які ўваходзіць у стэрыльны пакой, павінен быць у стэрылізаванай вопратцы і галаўных уборах.
У цяперашні час стэрыльныя пакоі ў асноўным існуюць на мікрабіялагічных фабрыках, у той час як у агульных лабараторыях выкарыстоўваюцца чыстыя сталы. Асноўная функцыя чыстага стала заключаецца ў выкарыстанні прылады ламінарнага патоку паветра для выдалення розных дробных пылінак, у тым ліку мікраарганізмаў, з працоўнай паверхні. Электрычная прылада дазваляе паветру праходзіць праз HEPA-фільтр і затым трапляць на працоўную паверхню, так што працоўная паверхня заўсёды знаходзіцца пад кантролем патоку стэрыльнага паветра. Акрамя таго, з вонкавага боку ёсць высакахуткасная паветраная заслона, каб прадухіліць трапленне знешняга бактэрыяльнага паветра.
У месцах са складанымі ўмовамі замест чыстага стала можна выкарыстоўваць драўляныя стэрыльныя скрыні. Стэрыльная скрыня мае простую канструкцыю і яе лёгка перамяшчаць. На пярэдняй панэлі скрыні ёсць два адтуліны, якія блакуюцца дзверцамі тыпу «націскная/цягавая», калі скрыня не працуе. Падчас працы можна прасунуць рукі ўнутр. Верхняя частка пярэдняй часткі абсталявана шклом для палягчэння ўнутранай эксплуатацыі. Унутры скрыні ёсць ультрафіялетавая лямпа, а посуд і бактэрыі можна загружаць праз невялікія дзверцы збоку.
Асептычныя аперацыйныя метады ў цяперашні час не толькі адыгрываюць ключавую ролю ў мікрабіялагічных даследаваннях і іх прымяненні, але і шырока выкарыстоўваюцца ў многіх біятэхналогіях. Напрыклад, у трансгенных тэхналогіях, тэхналогіях моноклональных антыцелаў і г.д.
Час публікацыі: 06 сакавіка 2024 г.