1. Мэта: Гэтая працэдура накіравана на забеспячэнне стандартызаванай працэдуры асептычных аперацый і абароны стэрыльных памяшканняў.
2. Сфера прымянення: лабараторыя біялагічных даследаванняў
3. Адказная асоба: Кантралёр кантролю якасці
4.Вызначэнне: Няма
5. Тэхніка бяспекі
Строга выконваць асептычныя аперацыі для прадухілення мікробнага заражэння; аператары павінны выключыць УФ-лямпу перад уваходам у стэрыльнае памяшканне.
6.Працэдуры
6.1. Стэрыльнае памяшканне павінна быць абсталявана стэрыльнай аперацыйнай і буфернай. Чысціня стэрыльнай аперацыйнай павінна дасягаць класа 10000. Тэмпература ў памяшканні павінна падтрымлівацца на ўзроўні 20-24 ° С, а вільготнасць - 45-60%. Чысціня чыстай лаўкі павінна дасягаць 100 класа.
6.2. Стэрыльнае памяшканне павінна падтрымлівацца ў чысціні, і катэгарычна забараняецца назапашваць смецце, каб прадухіліць заражэнне.
6.3. Строга не дапускайце заражэння ўсяго стэрылізацыйнага абсталявання і пажыўных асяроддзяў. Тыя, хто заражаны, павінны спыніць іх выкарыстанне.
6.4. Стэрыльнае памяшканне павінна быць абсталявана дэзінфікуюць сродкамі працоўнай канцэнтрацыі, напрыклад, 5% растворам крезола, 70% спіртам, 0,1% растворам хлорметионина і інш.
6.5. Стэрыльнае памяшканне неабходна рэгулярна стэрылізаваць і чысціць адпаведным дэзінфікуе сродкам, каб гарантаваць, што чысціня стэрыльнага памяшкання адпавядае патрабаванням.
6.6. Усе інструменты, інструменты, посуд і іншыя прадметы, якія неабходна ўнесці ў стэрыльнае памяшканне, неабходна шчыльна загарнуць і стэрылізаваць адпаведнымі метадамі.
6.7. Перад уваходам у стэрыльнае памяшканне персанал павінен вымыць рукі з мылам або дэзінфікуе сродкам, а затым пераапрануцца ў спецыяльную рабочую вопратку, абутак, галаўныя ўборы, маскі і пальчаткі ў буферным памяшканні (або зноў выцерці рукі 70% этанолам) перад уваходам у стэрыльнае памяшканне. Праводзяць аперацыі ў бактэрыяльнай камеры.
6.8. Перад выкарыстаннем стэрыльнага памяшкання неабходна ўключыць ультрафіялетавую лямпу ў стэрыльным памяшканні для апрамянення і стэрылізацыі больш чым на 30 хвілін і адначасова ўключыць чыстую лаву для прадзьмуху. Пасля завяршэння аперацыі стэрыльнае памяшканне неабходна своечасова ачысціць, а затым стэрылізаваць ультрафіялетам на працягу 20 хвілін.
6.9. Перад праверкай вонкавая ўпакоўка доследнага ўзору павінна захоўвацца ў цэласці і не павінна адкрывацца, каб прадухіліць заражэнне. Перад праверкай прадэзінфікуйце знешнюю паверхню ватнымі шарыкамі, растворанымі на 70% спірце.
6.10. Падчас кожнай аперацыі неабходна праводзіць адмоўны кантроль, каб праверыць надзейнасць асептычнага рэжыму.
6.11. Пры паглынанні бактэрыяльнай вадкасці вы павінны выкарыстоўваць шарык для адсмоктвання, каб паглынуць яе. Не дакранайцеся да саломінкі непасрэдна ротам.
6.12. Прышчэпачную іголку неабходна стэрылізаваць полымем да і пасля кожнага выкарыстання. Пасля астывання культуру можна прышчапіць.
6.13. Саломінкі, прабіркі, кубкі Петры і іншы посуд, які змяшчае бактэрыяльную вадкасць, трэба замачыць у стэрылізацыйным вядры з 5% растворам лізола для дэзінфекцыі, выняць і прамыць праз 24 гадзіны.
6.14. Калі бактэрыяльная вадкасць пралілася на стол або падлогу, неабходна неадкладна выліць 5% раствор карболовой кіслаты або 3% лізола на забруджаную вобласць не менш чым на 30 хвілін перад апрацоўкай. Калі спецадзенне і галаўныя ўборы забруджаныя бактэрыяльнай вадкасцю, іх трэба неадкладна зняць і памыць пасля стэрылізацыі парай пад высокім ціскам.
6.15. Усе прадметы, якія змяшчаюць жывыя бактэрыі, перад прамываннем пад кранам неабходна прадэзінфікаваць. Катэгарычна забараняецца забруджваць каналізацыю.
6.16. Штомесяц неабходна правяраць колькасць калоній у стэрыльным памяшканні. Адкрыўшы чыстую лаўку, вазьміце некалькі стэрыльных кубкаў Петры з унутраным дыяметрам 90 мм і асептычна ўвядзіце каля 15 мл пажыўнай агаравай асяроддзя, расплаўленай і астуджанай прыкладна да 45°C. Пасля зацвярдзення пастаўце яго ўверх дном пры тэмпературы ад 30 да 35. Інкубуйце 48 гадзін у інкубатары пры тэмпературы ℃. Пасля праверкі стэрыльнасці вазьміце ад 3 да 5 талерак і пастаўце іх злева, пасярэдзіне і справа ад працоўнага становішча. Адкрыўшы вечка і вытрымаўшы іх на 30 хвілін, змесціце іх уверх дном у інкубатар з тэмпературай ад 30 да 35°C на 48 гадзін і выміце. вывучыць. Сярэдняя колькасць розных бактэрый на пласціне ў чыстым памяшканні класа 100 не павінна перавышаць 1 калоніі, а сярэдняя колькасць у чыстым памяшканні класа 10000 не павінна перавышаць 3 калоній. Пры перавышэнні ліміту неабходна старанна прадэзінфікаваць стэрыльнае памяшканне, пакуль паўторныя праверкі не адпавядаюць патрабаванням.
7. Звярніцеся да главы (Метад праверкі стэрыльнасці) у раздзелах «Метады гігіенічнага кантролю лекаў» і «Стандартная аперацыйная практыка Кітая для праверкі лекаў».
8. Аддзел размеркавання: аддзел менеджменту якасці
Тэхнічныя рэкамендацыі па чыстых памяшканнях:
Пасля атрымання стэрыльнага асяроддзя і стэрыльных матэрыялаў мы павінны падтрымліваць стэрыльны стан, каб даследаваць пэўны вядомы мікраарганізм або выкарыстоўваць яго функцыі. У адваротным выпадку розныя мікраарганізмы звонку могуць лёгка змяшацца. З'ява змешвання непрыдатных мікраарганізмаў звонку ў мікрабіялогіі называецца забруджвальнымі бактэрыямі. Прадухіленне заражэння з'яўляецца найважнейшым метадам у мікрабіялагічнай працы. Поўная стэрылізацыя, з аднаго боку, і прадухіленне заражэння, з другога - гэта два аспекты асептычнай тэхнікі. Акрамя таго, мы павінны прадухіліць выхад даследуемых мікраарганізмаў, асабліва патагенных мікраарганізмаў або генна-інжынерных мікраарганізмаў, якіх не існуе ў прыродзе, з нашых эксперыментальных кантэйнераў у вонкавае асяроддзе. Для гэтых мэтаў у мікрабіялогіі існуе мноства мер.
Стэрыльная пакой звычайна ўяўляе сабой невялікае памяшканне, спецыяльна абсталяванае ў мікрабіялагічнай лабараторыі. Можна будаваць з лістоў і шкла. Плошча павінна быць не занадта вялікай, прыкладна 4-5 квадратных метраў, а вышыня - каля 2,5 метраў. Па-за межамі стэрыльнага памяшкання неабходна стварыць буфернае памяшканне. Дзверы буфернай пакоя і дзверы стэрыльнай пакоя не павінны глядзець у адным кірунку, каб паток паветра не прыносіў розныя бактэрыі. І стэрыльнае памяшканне, і буфернае памяшканне павінны быць герметычнымі. Вентыляцыйнае абсталяванне памяшканняў павінна мець прылады фільтрацыі паветра. Падлогу і сцены стэрыльнага памяшкання павінны быць гладкімі, добра забруджваць і лёгка мыцца. Працоўная паверхня павінна быць роўнай. І стэрыльнае памяшканне, і буферная пакой абсталяваны ўльтрафіялетавым асвятленнем. Ультрафіялетавае святло ў стэрыльнай пакоі знаходзіцца на адлегласці 1 метра ад працоўнай паверхні. Персанал, уваходзячы ў стэрыльнае памяшканне, павінен насіць стэрылізаванае адзенне і галаўныя ўборы.
У цяперашні час стэрыльныя пакоі ў асноўным існуюць на мікрабіялагічных заводах, у той час як у агульных лабараторыях выкарыстоўваюцца чыстыя стэнды. Асноўнай функцыяй чыстай лаўкі з'яўляецца выкарыстанне прылады ламінарнага паветранага патоку для выдалення рознай дробнай пылу, уключаючы мікраарганізмы, на працоўнай паверхні. Электрычная прылада дазваляе паветры праходзіць праз гепа-фільтр, а затым трапляць на працоўную паверхню, так што працоўная паверхня заўсёды знаходзіцца пад кантролем патоку стэрыльнага паветра. Акрамя таго, ёсць высакахуткасная паветраная заслона з боку, блізкага да вонкавага боку, каб прадухіліць пранікненне вонкавага бактэрыяльнага паветра.
У месцах са складанымі ўмовамі замест чыстай лаўкі можна выкарыстоўваць і драўляныя стэрыльныя скрыні. Стэрыльная скрынка мае простую канструкцыю і лёгка перамяшчаецца. У пярэдняй частцы скрынкі ёсць два адтуліны, якія блакуюцца двухтактнымі дзверцамі, калі яны не працуюць. Вы можаце выцягнуць рукі падчас працы. Верхняя частка пярэдняй часткі абсталявана шклом для палягчэння ўнутранай працы. Унутры скрынкі ёсць ультрафіялетавая лямпа, а посуд і бактэрыі можна пакласці праз маленькую дзверцу збоку.
Асептычныя метады працы ў цяперашні час не толькі гуляюць ключавую ролю ў мікрабіялагічных даследаваннях і прымяненні, але таксама шырока выкарыстоўваюцца ў многіх біятэхналогіях. Напрыклад, трансгенная тэхналогія, тэхналогія моноклональных антыцелаў і інш.
Час публікацыі: 6 сакавіка 2024 г